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            技术文章

            组织细胞内抗原的固定性点击次数:579 发布时间:2017-04-13

              组织细胞内抗原的固定是免疫酶标和非标记免疫酶组织化学方法中的重要环节。经过固定,可以达到如下目的:1.标本在玻片上的吸着力增加;2.标本所含的类脂和蜡质等成分可以除去,从而有利于抗原与酶标记抗体的结合;3.标本的保存时间可以增长,组织切片固定后,在-20,可以存放一年以上而不改变免疫酶技术的染色;组织内有关抗原不同,则所用固定剂与固定方法也随之改变。

               丙酮和乙醇是常用的两种固定剂。但对于许多病毒与细菌的定位研究,选择丙酮和四氯化化碳作为固定剂是zui合适的;对于可溶性蛋白抗原的定位,常用乙醇;对于多糖,则用8%10%福尔马林,而不用乙醇与丙酮等有机溶剂。

              对于植物病毒材料的固定,丙酮用得zui多,乙醇次之。因为丙酮对病毒的抗原性损害为zui小,但对于那些不稳定的病毒,则应避免固定。

              在应用免疫酶技术时,固定处理对酶的活性的影响也得心中有数。许多固定剂对抗原的活性都 会有所损害,例如,福尔马林对蛋白抗原的固定造成抗原性的破坏非常明显。因此,对福尔马林的使用必须严格控制浓度,一般使用的福尔马林浓度为10%,尽管如此,对抗原的抗原性还是有损害,所以必须进行抗原修复。

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