爱博登录网址,官网,官方网站,官方网址

<address id="55jb7"></address>

<b id="55jb7"></b>

<listing id="55jb7"></listing>

      <mark id="55jb7"><ruby id="55jb7"></ruby></mark>

      <form id="55jb7"><strike id="55jb7"></strike></form>

            <nobr id="55jb7"></nobr>

            技术文章

            培养基的制备方法及基本原则点击次数:833 发布时间:2016-06-07

            培养基的制备方法及基本原则

                培养基一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。不用的培养基的成分不同,但是步骤却大径相同。

                培养基的制备方法

                1.配料

                配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。

                2.溶解

                淀粉溶解:少量冷水调成糊状

                加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

                3.调PH

                用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。

                4.过滤

                滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)

                5.分装

                一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

                (1)三角瓶

                若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,zui多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。

                (2)试管分装

                液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;

                固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。

                6.包扎

                  分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

                7.灭菌

                按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

                8.摆斜面

                灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

                9.贮存

                培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

                培养基配置原则

                1、选择适宜的营养物质

                所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。

                2、营养物质浓度及配比合适

                培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖 类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长 繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。

                3、控制pH条件

                培养基的 pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的zui适pH条件各不相同,一般来讲,细菌 与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分 解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此, 为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4和K2HPO4)组成的混合物。

                4、控制氧化还原电位(redoxpotential)

                不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微 生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关, 也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下,可通过增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入氧化剂,从而增加F值;在培养 基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。

                5、原料来源的选择

                在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。

                灭菌处理

                要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。

            电话:
            13788993509
            13788995069
            021-64133189
            传真:
            021-64129208
            陈小姐点击这里给我发消息
            徐小姐点击这里给我发消息
            薛小姐点击这里给我发消息
             
            安全联盟站长平台

            中国化工仪器网

            推荐收藏该企业网站

            Sitemap

            重庆时时彩| 皇冠网址| pk10信誉平台|
            扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
            访问手机站